2026.09.05 2026.09.06

IgGの電気泳動【薬剤師国家試験111回問114】

hachi@11

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抗原Ｘに結合する単クローン由来のヒト免疫グロブリン（IgG1）は、2本の重鎖（H 鎖）と2本の軽鎖（L 鎖）からなり、図1に示すように、2本の重鎖間と重鎖・軽鎖間に4つのジスルフィド結合を含み、分子量がほぼ同じ12個の構造単位で構成される。
また、IgG1 全体の分子量は約 150 kDa である。
この IgG1 分子を界面活性剤であるドデシル硫酸ナトリウムの存在下で熱変性させ、ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行い、タンパク質に結合する色素（クマシーブリリアントブルー）で染色した。
ジスルフィド結合を還元する 2-メルカプトエタノールを加えて熱変性を行った場合と、加えないで熱変性を行った場合では、図2に示すように、泳動結果に違いがあった。
ただし、バンド2とバンド3に含まれる分子数の比は 1：1 であった。

以下の記述のうち、正しいのはどれか。２つ選べ。

１　2-メルカプトエタノールを加えて熱変性を行ったのは、実験2である。

２　バンド1から抽出したタンパク質は、電気泳動前のIgG1よりも強く抗原Ｘに結合することができる。

３　バンド2、バンド3の分子量は、それぞれ 100 kDa、50 kDa と見積もられる。

４　バンド3のタンパク質は、熱変性によって切断された重鎖の断片である。

５　バンド2とバンド3のタンパク質は、いずれも抗原結合部位を含む。

解答・解説

答えは１と５。

実験１　還元剤不使用

実験２　還元剤使用

２　熱変性によりタンパク構造が破棄されているため電気泳動前のIgG1よりも強く抗原Ｘに結合することはできない。

３　SDS-電気泳動では分子量が小さいもの（軽い）程、遠くに泳動される。

H鎖とL鎖の分子量比は2：1なので、
H鎖＝100kDa
L鎖＝50kDaだと分かる。

バンド２　H鎖×２
H鎖１個当たりの分子量：50kDa

バンド３　L鎖×２
H鎖１個当たりの分子量：25kDa

４　軽鎖。

抗体の構造【薬剤師国家試験107回問118】